唐古特白刺液泡膜Na+/H+逆向运输蛋白基因NtNHX1的克隆与表达分析
摘要
植物液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白具有将胞质中过多的Na^+区隔化在液泡内,从而减轻过量Na^+对细胞质的伤害,同时维持细胞的渗透势,利于植物抵御盐胁迫.以2年生唐古特白刺嫩叶为试材,采用RT-PCR和RACE方法从叶片中获得1个NHX基因cDNA全长,命名为NtNHX1,GenBank登录号为KF751928.序列分析结果表明:NtNHX1全长2 134 bp,包含281 bp的5’非编码区、218 bp的3’非编码区和29 bp的poly(A)尾巴.该cDNA编码1个544个氨基酸的多肽,等电点为8.14,推测分子质量为59.9 kDa.通过与其他物种的NHX1氨基酸序列比对,NtNHX1基因与柑橘同源性最高达81%.NtNHX1基因存在12个跨膜结构域,其中TM3跨膜结构域上具有高度保守的氨氯吡嗪脒结合位点(LFFIYLLPPI).该位点与Na+有竞争作用.相对荧光定量PCR分析表明,NtNHX1在根、茎、叶中均有表达,叶中的表达量明显高于茎和根;在高浓度盐(200 mmol· L-1 NaCl)处理下,NtNHX1在叶中的转录水平显著增强,在处理12 h后表达量达到最大值.由此推断,NtNHX1基因的表达与盐胁迫的诱导和调节有关.
引用本文(GB/T 7714)
唐欣, 王瑞辉, 杨秀艳, 等. 唐古特白刺液泡膜Na+/H+逆向运输蛋白基因NtNHX1的克隆与表达分析[J]. 林业科学, 2014.
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