首页 / 资料库 / 文献详情

中间脉孢霉谷氨酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌和烟草中的表达

波 田、芳 王

2001Chinese Science Bulletin (Chinese Version)Energy被引 3

摘要

用谷氨酸脱氢酶(GDH)提高植物氮肥利用率是国际上生物工程研究的热点之一.通过RT-PCR方法克隆了真菌中间脉孢霉(<italic>Neurospora intermedia</italic>,简称<italic>Ni</italic>),好食脉孢霉(<italic>N.sitophila</italic>),粗糙脉孢霉(<italic>N.crassa</italic>)的<italic>gdh</italic>基因,进行序列测定.前两种<italic>gdh</italic>基因的序列为首次报道.分别将上述<italic>gdh</italic>基因克隆入pET30a质粒在大肠杆菌中表达,纯化后进行酶活性及米氏常数(<italic>K</italic>_m)测定,结果发现大肠杆菌表达的<italic>Ni</italic>-GDH具有更高的酶活性,其<italic>K</italic>_m值在0.3~0.45 mmol/L左右.选择<italic>Ni-GDH</italic>基因转化烟草,发现它能促进烟草在低氮水平下的生长.

引用本文（GB/T 7714）

DOI：https://doi.org/10.1360/csb2001-46-2-137