云芝免疫调节蛋白TVC的纯化与特性
摘要
生物活性蛋白是药用真菌中一类重要的活性功能因子. 云芝是中国传统的药用真菌, 具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等活性. 通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤层析等过程, 从云芝子实体中分离纯化得到一种新的免疫调节蛋白(命名为TVC). TVC在SDS-PAGE结果中呈现分子量为15 kD的单一条带, 而在Native-PAGE结果中表现分子量为30 kD, 表明天然的TVC为同源二聚体. 等电聚焦电泳表明, TVC的等电点pI为4.0, 为酸性蛋白质, 根据periodic acid/Schiff试剂染色反应表明, TVC不含糖, 且对大鼠红细胞没有凝集作用, 表明TVC缺乏凝集素的典型特征. 免疫活性测定, 应用流式细胞仪检测发现TVC能增强小鼠脾淋巴细胞的增殖, 但对CD<sup>4+</sup>, CD<sup>8+</sup>等T细胞无影响; TVC以剂量依赖的方式对人外周血淋巴细胞有增殖活性, 同时与刀豆蛋白A有联合增殖效应; TVC还能以剂量依赖方式提高脂多糖LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7产生NO和肿瘤坏死因子TNF-α的产量, 表明TVC是一种免疫刺激剂, 能够提高机体的免疫反应. N端测序和蛋白质MALDI-TOF/TOF质谱, 没有在蛋白质数据库中发现同源蛋白质, 说明TVC是一个新的免疫调节蛋白.
引用本文（GB/T 7714）
敏 安, 永杰 张, 华安 文, 等. 云芝免疫调节蛋白TVC的纯化与特性[J]. Scientia Sinica Vitae, 2010.
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