一种快速高效分离和纯化重组腺病毒伴随病毒载体的方法
摘要
利用2型腺病毒伴随病毒(adeno-associated virus type 2, AAV-2)能够抵抗氯仿的特性, 采用“氯仿处理-PEG/NaCl沉淀-氯仿抽提” 3个步骤分离、浓缩和纯化重组腺病毒伴随病毒(recombinant adeno-associated virus, rAAV), 整个纯化过程可在4 h内完成. 最终从5个转瓶生长的4×10<sup>9</sup>个载体生产细胞中可得到5×10<sup>13</sup> 病毒颗粒/mL, SDS-聚丙烯酰胺凝胶结果表明, rAAV的纯度大于95%, 电子显微镜下绝大多数病毒颗粒的结构完整. 纯化后的rAAV仍保持较强的感染性, 其感染性滴度达到2×10<sup>12</sup> 转导单位(transducing unit, TU)/mL, 总的病毒颗粒数与感染性病毒颗粒数的比值为25. 为rAAV 大规模生产后的纯化提供了一种简便、快速、低成本的方法.
引用本文（GB/T 7714）
小岩 董, 小兵 吴, 志坚 伍, 等. 一种快速高效分离和纯化重组腺病毒伴随病毒载体的方法[J]. Chinese Science Bulletin (Chinese Version), 2000.
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