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紫云英参与共生固氮的2个新结瘤素基因的分离与鉴定

俊初 周、新元 魏、敏霞 丑、大松 陈

2007Chinese Science Bulletin (Chinese Version)Agricultural and Biological Sciences被引 1开放获取

摘要

通过抑制差减杂交, 比较了接种华癸中生根瘤菌(<italic>Mesorhizobium huakuii</italic>) 7653R的紫云英(<italic>Astragalus sinicus</italic>)的根与未接种根瘤菌的对照根在转录水平上的差异, 建立了紫云英共生结瘤过程中的差异表达基因文库, 并在此基础上证实了2个结瘤特异性基因<italic>AsⅡC259</italic>和<italic>AsG2511</italic>. 其可读框显示, <italic>AsⅡC259</italic>和<italic>AsG2511</italic>编码的多肽链长度分别为134和58个氨基酸, 其氨基端均含有一个信号肽. 结构域查询结果揭示, AsⅡC259编码的多肽链包含了2个N-糖基化位点、一个依赖于cAMP的蛋白激酶(PKA)和cGMP依赖的蛋白激酶(PKG)磷酸化位点以及一个酪蛋白激酶Ⅱ(CK2)磷酸化位点. BlastP同源搜索表明, AsⅡC259多肽链仅与一个来自羽扇豆(<italic>Lupinus luteus</italic>)根瘤的新结瘤素蛋白表现出较低的同源性. 对于AsG2511多肽链, 没有发现任何明显的同源序列. Virtual Northern blot和半定量RT-PCR分析表明, <italic>AsⅡC259</italic>和<italic> AsG2511</italic>均只在接种根中表达, 说明它们确为结瘤特异性基因; 另外, 这2个基因的表达比豆血红蛋白基因晚2~4 d, 应为晚期结瘤素基因.

引用本文（GB/T 7714）

DOI：https://doi.org/10.1360/csb2007-52-18-2140