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钙调蛋白磷酸酶B亚基生物学活性检测方法建立

莉 徐新昌 史宗文 黄春明 饶宇东 韩群 魏欢 杨翔 李

2016Scientia Sinica VitaeBiochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 1开放获取

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摘要

建立钙调蛋白磷酸酶B亚基(calcineurin subunit B, CNB)生物活性检定方法用以质量控制. CNB能促 进钙调蛋白磷酸酶A亚基(CNA)的突变体CNAΔ316的活性, 增强其分解底物对硝基苯磷酸二钠(<italic>p</italic>-nitro- phenylphosphate, pNPP)的能力. 采用四参数方程对不同浓度CNB和相应的pNPP最大分解速率进行拟合, 用平行线分析法对供试品和参考品进行量值传递, 得到供试品的活性值. 然后对该方法的准确度、精密度、线性、线性范围、灵敏度、特异性和耐久性进行验证. 回收率结果均在98%以上, 板内精密度为6.7%, 板间精密度为10.8%, 决定系数大于0.98, 线性范围为0.05~50 μg/mL, 灵敏度为50 μg/mL. 部分细胞因子无法促进CNAΔ316分解底物pNPP的能力. 在一定范围内, CNAΔ316浓度对检测结果没有影响.

引用本文(GB/T 7714)

莉 徐, 新昌 史, 宗文 黄, 等. 钙调蛋白磷酸酶B亚基生物学活性检测方法建立[J]. Scientia Sinica Vitae, 2016.

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DOI:https://doi.org/10.1360/05scls-2015-0371

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