优质HMW谷蛋白亚基转基因小麦的获得及其遗传稳定性和品质性状分析
摘要
利用编码除草剂PPT抗性的<I>bar</I>基因作为选择标记, 构建了含有优质HMW谷蛋白亚基<I>1Dx5</I>和<I>1Dy10</I>基因的植物表达载体pBPC30, 用基因枪导入京花1号、京411号和京冬6号等受体品种的幼胚和幼穗, 获得了一批转基因小麦植株(T<SUB>0</SUB>)及其后代株系(T<SUB>1</SUB>~T<SUB>5</SUB>). PCR, 点杂交和Southern杂交鉴定表明, 外源基因已整合到转化植株T<SUB>0</SUB>的基因组, 并稳定表达. 转基因植株T<SUB>1</SUB>代能抗20~80 mg/L的PPT, 其中1株抗性超过150 mg/L. 经SDS-PAGE分析表明, 外源<I>1Dx5</I>和<I>1Dy10</I>基因在T<SUB>2</SUB>代不同株系中获得了表达. 转基因系TG3-74缺失了亚基8, 但亚基2, 5, 10和12都表达, 同时出现了一个新的亚基位于亚基7与原有亚基8之间(暂记为8<SUP>*</SUP>). 品质分析结果表明, 有5个株系的Zeleny沉淀值为44.2~49.0 mL, 与对照CNN(48.0 mL)相当, 分别比京花1号(26.9 mL)和京冬6号(30.7 mL)提高了59.6% ~ 64.3%. T<SUB>5</SUB>代株系的粉质曲线稳定时间比受体品种(3~7 min)大幅增长, 转基因株系TG5-23b的稳定时间为16 min, TG1-28d, TG3-76b, TG5-98和TG5-99的面团稳定时间高达30 min以上.
引用本文(GB/T 7714)
凤萍 杨, 绪清 陈, 晓东 张, 等. 优质HMW谷蛋白亚基转基因小麦的获得及其遗传稳定性和品质性状分析[J]. Chinese Science Bulletin (Chinese Version), 2003.
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