假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位研究
摘要
包涵体膜蛋白在沙眼衣原体致病过程中发挥重要的作用. 为确定假定蛋白CT440 在沙眼衣原体感染细胞中的定位及特征, 本研究采用PCR方法从D型沙眼衣原体的基因组中扩增<italic>Ct440</italic>基因, 克隆入pGEX-6p 原核表达载体构建pGEX-6p/<italic>Ct440</italic>原核表达重组体, 重组体转化到XL1-blue 大肠杆菌, IPTG 诱导表达融合蛋白GST-CT440. 纯化后的CT440 融合蛋白免疫小鼠制备抗体, 间接免疫荧光(IFA)和Western blot 测定抗体的特异性. 特异性抗体用于分析CT440 蛋白在衣原体感染细胞内的定位、表达时相特征及其对衣原体感染的影响. 结果表明, CT440 蛋白定位于沙眼衣原体包涵体膜上, 为沙眼衣原体包涵体膜蛋白; 该蛋白在衣原体感染12 h 后开始表达, 直至持续到整个感染周期; 转基因在胞浆表达的CT440 融合蛋白不影响其后的衣原体感染. 本实验为深入研究衣原体与宿主细胞间的相互作用, 阐明衣原体致病机制提供了重要的实验依据.
引用本文（GB/T 7714）
移谋 吴, 光明 钟, 洲 周, 等. 假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位研究[J]. Scientia Sinica Vitae, 2012.
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