不结球白菜抗坏血酸相关基因 BcMDHAR2 功能验证
摘要
目的本文旨在验证单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)多基因家族中MDHAR2基因的功能，以探索其对不结球白菜抗坏血酸(AsA)含量的影响。 方法以不结球白菜'苏州青'cDNA为模板，扩增BcMDHAR2基因的ORF全长，利用生物信息学分析其氨基酸序列；通过亚细胞定位研究BcMDHAR2在细胞中的表达位置，采用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)检测非生物胁迫和激素处理下BcMDHAR2基因的表达量；通过病毒诱导的基因沉默(VIGS)验证该基因对抗坏血酸含量的影响。 结果BcMDHAR2基因包含1个1 308 bp的开放式阅读框(ORF)，编码435个氨基酸。进化树分析表明，BcMDHAR2蛋白与芜菁的进化关系最近。亚细胞定位显示，BcMDHAR2定位于细胞核和细胞质、细胞膜上。RT-qPCR表明，低温、盐胁迫、重金属离子以及外源激素处理下，在一定时间内BcMDHAR2表达量上调，随后下调。该基因对光周期有一定的响应，随着光照时间变长，表达量上调，黑暗后，BcMDHAR2表达量下调。BcMDHAR2基因沉默后植株中AsA含量降低，AsA循环中相关基因的表达量发生了一定变化，而植株中SOD活性升高。 结论BcMDHAR2表达量随外界条件变化而变化，响应不同的激素诱导和胁迫，在不结球白菜中该基因正调控AsA含量。
引用本文（GB/T 7714）
周颖, Ying Zhou, Yan Li, 等. 不结球白菜抗坏血酸相关基因 BcMDHAR2 功能验证[J]. 未知来源, 2021.
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