Prokaryotic expression, purification, and polyclonal antibody production of a hydrophobin from Grifolafrondosa

Zefang、Wang、Shuren、Feng、Yujian、Huang、Mingqiang、Qiao Qiao

2010生物化学与生物物理学报：英文版Biochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 1

摘要

Hydrophobins 是小真菌的蛋白质自我装配自发地在 hydrophilichydrophobic 接口和变化他们属于的表面的极的性质。新 hydrophobin 基因 hgfI 最近从可食的蘑菇 Grifola frondosa 被识别。在这份报纸，克隆，表示，纯化，和 HGFI 的 polyclonal 抗体准备被描述。hgfI 基因在 EcoRI 和 NdeI 限制地点被克隆进 pET-28a 表示 plasmid 然后转变了成 Escherichia coli BL21 紧张。SDS 页分析证明那 recombinant HGFI 蛋白质被优化集中和 IPTG 的正式就职时间令人满意地表示。因为它的包括身体在传统的处理方法是不可溶解的，表示 recombinant HGFI 蛋白质被 electroelution 净化。在有 Sephadex G-25 的一个脱盐的过程以后， recombinant HGFI 蛋白质被用来使跟随标准协议的成年兔子免疫。ELISA 和西方的污点分析显示生产抗血清能检测表示在的两 HGFI 蛋白质原核生物(E。coli ) 并且在真核细胞的房间(G。frondosa ) 。而且，抗血清被用来在 G 决定 HGFI 蛋白质的本地化。用一种 immunofluorescence 技术的 frondosa 房间。结果证明那 HGFI 蛋白质在房间墙中是局部性的，特别在 hypha 的开始发育的位置。对 HGFI 的 polyclonal 抗体将便于进一步的生产和 HGFI 蛋白质的功能的学习。

引用本文（GB/T 7714）

Zefang, Wang, Shuren, 等. Prokaryotic expression, purification, and polyclonal antibody production of a hydrophobin from Grifolafrondosa[J]. 生物化学与生物物理学报：英文版, 2010.

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