Organelle pH in the Arabidopsis Endomembrane System
摘要
细胞内部的分隔空间的 pH 为房间的生存能力是必要的。尽管有它的关联，很少对这些分隔空间的 pH 被知道。到在 vivo 的措施 pH，我们首先由联合修改溶解度的绿色的改进溶解度的特征产生了二个 pH 传感器荧光灯有 pHluorins 和 codon 的察觉到 pH 能力的蛋白质(GFP )(smGFP ) 在 Arabidopsis 为表示优化了。当 pH 与荧光消失在 pH 被降低， PEpHluorin (plant-solubility-modified 黄道 pHluorin ) 逐渐地失去荧光 6.2 并且 PRpHluorin (plant-solubility-modified ratiomatric pHluorin ) ，一个双刺激的传感器，允许精确大小。分隔空间特定的传感器被进一步熔化特定的排序的信号到 PEpHluorin 和 PRpHluorin 产生。我们的结果证明 cytosol 和原子核的 pH 是类似的(pH 7.3 和 7.2 ) 当 peroxisomes， mitochondrial 矩阵，和 plastidial 基质有碱的 pH 时。能分泌的小径的分隔空间揭示渐渐的使发酸，从 pH 跨越 7.1 在 endoplasmic 蜂窝胃(嗯) 到 pH 5.2 在液泡。令人惊讶地，在 trans-Golgi 网络(TGN ) 的 pH 和 multivesicular 身体(MVB ) 是，与 pH 6.3 和 6.2，相当类似。有 concanamycin A (ConcA ) 的 vacuolar 类型 H+-ATPase (V-ATPase ) 的抑制在 TGN 和液泡在 pH 引起了激烈的增加。总的来说， PEpHluorin 和 PRpHluorin 分别地是为在 vivo 的 pH 的可视化和 quantification 的优秀 pH 传感器。