耐辐射球菌DNA修复开关基因<I>pprI</I>缺陷性突变和功能补偿性突变株的建立
摘要
<i>PprI</i>是近来在耐辐射球菌<i>Deinococcus radiodurans</i>中发现的一个极其重要的DNA修复开关基 因. 以已测序的野生型菌株R1为材料, 运用PCR突变法将克隆具有自身GroEL启动子和卡那霉素抗性基因的DNA片段反向重组到pprI基因中去, 首次获得了卡那霉素抗性的、<i>pprI</i>功能完全破坏的突变株YR1. 辐射细胞生存率结果表明, YR1对辐射异常敏感. 另外, 将含有GroEL启动子和卡那霉素抗性基因的DNA片段重组到质粒pRADZ3中, 获得了具有卡那霉素抗性的表达质粒pRADK; 再将体外克隆的具有<i>pprI</i>完整基因和C-末端结构域截短的PprI蛋白基因片段分别重组到pRADK中. 研究结果表明, 含有<i>pprI</i>完整基因的表达质粒在YR1中能够正常表达, 并完全恢复到野生型的极端抗性; 而C-末端结构域截短的PprI蛋白基因片段虽能在YR1中正常表达, 但对辐射异常敏感, 不能恢复其极端抗性. 上述<i>pprI</i>基因功能缺陷性和功能补偿性突变株的建立, 为深入研究细胞体内PprI蛋白质的定位、结构域与功能的关系, 以及原位研究PprI蛋白质的理化特性提供了十分有效的方法
引用本文（GB/T 7714）
丽芬 黄, 冠军 高, 辉明 陆, 等. 耐辐射球菌DNA修复开关基因&lt;I&gt;pprI&lt;/I&gt;缺陷性突变和功能补偿性突变株的建立[J]. Chinese Science Bulletin (Chinese Version), 2005.
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