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Microarray analysis of Escherichia coliO157：H7

Huiying、Jin Jin、Kai-Hua、Tao Tao、Yue-Xi、Li、Fa-Qing、Su-Qin

2005Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunyatseniEnvironmental Science被引 1

摘要

瞄准：为检测 O157 建立快速、特定、敏感的方法: 有 DNA 微芯片的 H7。方法：遗传因子的细菌的反和 E 的剧毒的基因的特定的 oligonucleotide 探针(26-28 nt ) 。关口 i O157 : H7 和另外的相关病原体基因被预先综合并且在稳固的支持上使不能调动做微芯片。编码 O157 菌体抗原(rfbE ) 的四基因， H7 flagellar (警察) 和毒素(SLT1， SLT2 ) 被复合 PCR 与四份特定的教材监视。为杂交标记样品的 Fluorescence-Cy3 被 PCR 与标记 Cy3 的单个素数产生。杂交在 45 度为 60 min 被执行。微芯片图象用一台共焦的荧光灯的扫描仪被拿。结果：12 不同细菌的紧张与四剧毒的基因的各种各样的联合被检测。所有 O157 : H7 紧张由复合 PCR 产出阳性结果。与这些教材产生的 PCR 产品的尺寸从 210 ～ 678 bp 变化了。所有 rfbE/fliC/SLT1/SLT2 探针明确地从 O157 认出了标记 Cy3 的荧光灯的样品: 包含 O157 和 H7 基因的 H7 紧张，或紧张。O157 的没有生气杂交: H7 荧光灯的样品发生在另外的探针。Non-O157 : H7 病原体没能在可比较的条件下面产出任何信号。如果 O157 单个 PCR 的标记 Cy3 的荧光灯的产品是冲淡的 50 褶层，没有信号在统帅玫瑰胶化电气泳动被发现，但是一个积极信号在微数组杂交被发现。结论：O157 的 Microarray 分析: H7 是为细菌的病原体的鉴定和察觉的一个快速、特定、有效的方法。

引用本文（GB/T 7714）