细菌Ⅱ型分泌途径控制产碱假单胞菌(<i>Pseudomonas alcaligenes</i>) S2中卵磷脂酶的分泌
摘要
从水稻根际分离筛选出1株降解卵磷脂的有机磷降解细菌菌株S2, 通过形态指标、生理生化性状、16S rDNA序列、(G+C)含量以及DNA-DNA杂交分析, 鉴定为产碱假单胞菌(<i>Pseudomonas alcaligenes</i>). 采用双亲接合的方法将带有Tn5转座子的质粒导入产碱假单胞菌S2菌株中进行转座子插入诱变, 从5000个卡那霉素抗性的Tn5插入突变株中, 筛选到3株丧失解磷能力的突变株(M808, M1329和M1400)和1株解磷能力增强的突变株(M20). 对Tn5插入位点的基因进行DNA测序表明, 丧失解磷能力突变株中被突变的基因分别是<i>xcpS, xcpX</i>和<i>xcpW</i>, 它们分别编码XcpS, XcpX和XcpW蛋白, 这些蛋白是细菌Ⅱ型分泌途径中的主要成分. 将<i>xcpS, xcpX</i>和<i>xcpW</i>基因分别构建在pLAFR3载体上, 通过双亲接合的方式分别导入上述M808, M1329和M1400三个丧失解磷能力突变株中进行功能互补实验, 结果表明这3个基因都能使各自相对应的突变株恢复解磷能力. 以上结果表明, 在产碱假单胞菌中卵磷脂酶的分泌是通过Ⅱ型分泌途径来完成的. 解磷能力的丧失可能是由于Tn5插入xcp基因簇中的某一基因破坏了卵磷脂酶向胞外的分泌, 造成突变株不能降解有机磷. 在解磷能力增强突变株M20中, 被突变的基因与铜绿假单胞菌(<i>Pseudomonas aeruginosa</i>) PAO1中的<i>chpA</i>基因(参与细菌的颤动)同源性达88%.
引用本文（GB/T 7714）
季伦 李, 静 吕, 繁 李, 等. 细菌Ⅱ型分泌途径控制产碱假单胞菌(&lt;i&gt;Pseudomonas alcaligenes&lt;/i&gt;) S2中卵磷脂酶的分泌[J]. Chinese Science Bulletin (Chinese Version), 2005.
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