SKP2 siRNA inhibits the degradation of P27^kip1 and down-regulates the expression of MRP in HL-60/A cells
摘要
S 阶段联系 kinase 的蛋白质 2 (SKP2 ) 基因是肿瘤 suppressor 基因，并且涉及 P27kip1 的调停 ubiquitin 的降级。SKP2 和 P27kip1 影响通过调整白血病房间的增长， apoptosis 和区别继续和白血病的预后。在这研究，我们探索了通过 SKP2 下面规定 HL-60/A 药抵抗逆行的机制。HL-60/A 房间是由有 SKP2 siRNA 的 Amaxa Nucleofector 系统的 nucleofected。Skp2， P27kip1，和多药抵抗的基因和蛋白质表示层次联系了蛋白质(MRP ) 被反向的抄写聚合酶链反应和西方的污点分析分别地决定。房间周期被流动 cytometry 分析。50% 禁止的集中价值在 chemotherapeutics 的不同集中下面根据这些二种房间的死亡率用细胞毒素的分析被计算比较房间的敏感。HL-60/A 房间显示出由抗力移转特征的多药抵抗显型到 adriamycin， daunorubicin，和 arabinosylcytosine，由于 MRP 的表示。我们发现 SKP2 的表示比在 HL-60 房间在 HL-60/A 房间是更高的，但是 P27kip1 的表示更低。而 P27kip1 的蛋白质水平是起来调整的，在由 SKP2 siRNA 的 HL-60/A 房间 nucleofected 的 SKP2 的表示是下面调整的。与在控制组(由控制 siRNA 的 nucleofected ) 的 MRP 表达式水平相比， mRNA 和蛋白质表达式由 SKP2 siRNA 在 HL-60/A 房间 nucleofected MRP 铺平更低，并且后者房间对 adriamycin， daunorubicin，和 arabinosylcytosine 更敏感。下面调整在 G0/G1 阶段的 SKP2 表示和逮捕房间与下面调整的 MRP 改进白血病房间的药敏感表示。