首页 / 资料库 / 文献详情

用基因重组<I>α</I>-半乳糖苷酶进行B→O血型改造

锋 宫、会明 任、扬培 章、守平 季、新 高、琼 曹、素波 李、军 杨

2003Chinese Science Bulletin (Chinese Version)Economics, Econometrics and Finance被引 1

摘要

<i>α</i>-半乳糖苷酶是进行B→O血型改造的工具酶. 采用RT-PCR方法, 从中国海南Catimor咖啡豆中克隆了全长1.1 kb的<i>α</i>-半乳糖苷酶cDNA, 并构建了其表达载体. 电穿孔法将载体导入毕赤酵母GS115细胞, 筛选出重组<i>α</i>-半乳糖苷酶菌株. 离子交换层析纯化出<i>α</i>-半乳糖苷酶, 酶比活性从15 U/mg 提高到28.14 U/mg. 进一步鉴定了酶的生物化学性质, 其<i>K</i>_m= 0.275, <i>V</i>_max = 0.014 mmol·L^-1·min^-1. 据此确定了B→O血型改造的条件: pH 5.5~5.6, 每毫升红细胞使用100 U <i>α</i>-半乳糖苷酶, 26℃, 4 h. 经动物输血实验初步证明, 酶解反应后的通用O型血(enzymatically converted group O red blood cells, ECORBC)是安全的.

引用本文（GB/T 7714）

DOI：https://doi.org/10.1360/csb2003-48-1-43