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九孔鲍 BMP -2基因cDNA克隆及表达分析

艾加林、AI Jia-lin、栗志民、Zhimin Li、刘建勇、Liu Jianyong、申玉春、Shen Yuchun

2018Agricultural and Biological Sciences被引 1

摘要

为探究BMP-2基因在九孔鲍(Haliotisdiversicolorsupertexta)中的功能, 采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术从九孔鲍外套膜中获得了BMP-2基因cDNA全长, 并用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测了BMP-2基因在各组织和发育时期的表达水平。结果表明:九孔鲍BMP-2基因cDNA全长2572bp, 其中5′非编码区(5′UTR)123bp, 3′非编码区(3′UTR)1150bp, 开放阅读框(ORF)为1299 bp, 编码432个氨基酸, 其分子质量为48.59ku, 理论等电点(pI)为9.84;具有N端信号肽(1-39 aa)、TGF-β前肽区域(63-294 aa)和TGF-β成熟肽区域(331-432 aa), 以及蛋白酶水解位点RLRR (272-275 aa)和7个保守的半胱氨酸残基, 符合TGF-β超家族蛋白典型结构特征。系统进化树结果显示九孔鲍BMP-2基因和耳鲍聚为一支。qRT-PCR结果表明BMP-2基因在九孔鲍的6个组织中均有表达, 在足、右侧壳肌、外套膜及肝脏中显著高表达; 在检测的7个发育时期均表达, 其中在受精卵、4细胞、8细胞、原肠胚、稚鲍时期表达量显著高于卵、幼鲍时期。研究表明BMP-2基因可能在九孔鲍贝壳形成中具有重要作用。

引用本文（GB/T 7714）

DOI：https://doi.org/10.11759/hykx20180310001