基于BAC同源重组高效构建小鼠胚胎干细胞<italic>Nanog</italic>基因报告体系
摘要
Nanog是最新发现的一个在胚胎干细胞(ES细胞)中特异表达, 并在保持ES细胞多能性的机制中有重要作用的转录因子. <italic>Nanog</italic>基因的表达能非常灵敏地随ES细胞的分化而下调, 使之成为指示ES细胞多能性最理想的标志基因之一. 本研究基于细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, BAC)同源重组技术, 并改进了将报告基因敲入目的位点的重组方案, 高效构建了小鼠ES细胞(mES细胞)的Nanog/EGFP报告体系. 基因打靶后的mES细胞具有与其源mES细胞相同的特性, 并能稳定地将Nanog与EGFP (enhanced green fluorescence protein)的表达偶联. 此报告体系能通过EGFP的表达有效报告<italic>Nanog</italic>基因的表达水平, 从而对mES细胞分化或未分化状态作出明显指示. 本研究为mES细胞自我更新和分化的研究提供了一个理想的实验体系, 不仅能用于进一步优化mES细胞的培养体系, 对研究<italic>Nanog</italic>的表达调控及其与其他维持mES细胞多能性的因子和途径之间的关系也有深远的意义.
引用本文（GB/T 7714）
彦 范, 明孝 丁, 立颖 杜, 等. 基于BAC同源重组高效构建小鼠胚胎干细胞&lt;italic&gt;Nanog&lt;/italic&gt;基因报告体系[J]. Chinese Science Bulletin (Chinese Version), 2007.
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