青光眼小鼠Thy1-CFP-DBA/2J表达melanopsin蛋白的视网膜节细胞的丢失及小鼠行为学分析
摘要
为了研究表达melanopsin蛋白的视网膜神经节细胞在青光眼小鼠的抑郁性行为中所起的作用, 本文使用不同年龄的青光眼小鼠Thy1-CFP-DBA/2J (CFP-D2) 2, 5, 8, 11, 14个月龄各5只, 对照组为C57BL/6小鼠2, 8, 14个月龄各5只. 对视网膜平铺片进行免疫组织化学染色、细胞计数及形态学分析; 旷场实验分析小鼠的行为学特征. 实验结果显示, CFP-D2小鼠其眼内压随着年龄的增加逐渐升高, 视网膜也发生了相应改变, 包括表达CFP细胞数量的减少(细胞/mm<sup>2</sup>; 2 mo (月龄): 1309±26, 14 mo: 878±30, <italic>P</italic><0.01), 视网膜神经节细胞的减少(2 mo: 48±3, 14 mo: 19±4, <italic>P</italic><0.001), 表达Brn-3b的视网膜神经节细胞数量的减少(2 mo: 1283±80, 14 mo: 950±31, <italic>P</italic><0.001), 以及视网膜神经节细胞中Brn-3b阳性细胞所占比例的下降(5 mo: 50.17%±5.5%, 14 mo: 12.61%±3.8%, <italic>P</italic><0.001), 形态学定量分析表明视网膜神经节细胞的树突野面积也逐渐减小(mm<sup>2</sup>; 2 mo: 0.077±0.015, 14 mo: 0.065±0.015, <italic>P</italic><0.05). 旷场实验指标分析(包括总的运动距离, 进入中央区域的次数, 在中央的时间占总的时间的比例)表明不同月龄的CFP-D2小鼠始终处于一种高活动度的状态. 综合上述实验结果, 本文证实, CFP-D2小鼠青光眼所致的高活动度状态与视网膜神经节细胞相关, 尤其是与Brn-3b阳性的视网膜神经节细胞的功能异常有关.