九孔鲍 MSTN 基因cDNA克隆及表达
摘要
肌肉生长抑制素( MSTN )是转化生长因子β超家族( TGF-β )中参与动物肌肉生长的重要调控因子。为了解 MSTN 基因在九孔鲍中的功能,本研究采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术从九孔鲍右侧壳肌中获得了 MSTN 基因cDNA全长,并运用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)技术检测了 MSTN 在各组织和发育时期的表达水平。结果显示,九孔鲍cDNA全长3 755 bp,其中5′非编码区(5′UTR)324 bp,3′非编码区(3′UTR)1 985 bp,开放阅读框(ORF) 1 446 bp,编码481个氨基酸,分子质量为54.96 ku,理论等电点pI为9.41;具有N端信号肽(1~17 aa)、 TGF-β 前肽区域(157~367 aa)和成熟肽区域(379~481 aa),以及蛋白酶水解位点RRPR (364~368 aa)和C端生物活性区9个保守的半胱氨酸残基,符合 TGF - β 超家族蛋白典型结构特征,且预测到2个新的蛋白酶水解位点RQRR (120~124 aa)、RYRR (235~239 aa)。系统进化树结果显示,九孔鲍 MSTN 基因和红鲍 MSTN 基因聚为一支。qRT-PCR结果表明,九孔鲍 MSTN 基因在检测的6个组织中均表达,且在足、右侧壳肌、外套膜中高表达,在鳃、性腺、肝脏中低表达;在检测的7个发育时期均表达且在受精卵、原肠胚、稚鲍时期高表达,在卵、4细胞期、8细胞期、幼鲍时期表达量较低。研究表明 MSTN 基因可能在九孔鲍肌肉生长中具有重要作用。
引用本文(GB/T 7714)
艾加林, Ai JiaLin, 栗志民, 等. 九孔鲍 MSTN 基因cDNA克隆及表达[J]. 未知来源, 2018.
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