玉米联合固氮菌 Kosakonia radicincitans GXGL-4A的分离鉴定与固氮特性研究
摘要
目的固氮微生物是生物固氮的主体，其菌种的选育更是生物固氮研究的基础。本实验室分离鉴定出一株新的固氮菌，并对其固氮相关活性进行初步研究。 方法固氮菌采用Ashby无氮培养基进行分离纯化。通过形态特征分析、生理生化特征分析、16S rRNA基因序列分析和基因组扫描对固氮菌进行鉴定。利用靛酚蓝-分光光度法检测固氮菌的泌铵能力。固氮酶活性的测定使用乙炔还原法。 结果从玉米根部分离到一株固氮菌株GXGL-4A，菌体短杆状，大小约为1.5 µm×0.5 µm，单个或常见2个菌体细胞串联在一起，革兰氏染色结果为阴性。16S rRNA基因序列分析结果表明该菌株与Kosakonia oryzaeFo8A1d 16S rRNA基因序列有95%的相似性，结合形态特征、生理生化特征和基因组扫描，将其命名为K.radicincitansGXGL-4A。对其进行固氮基因nifH的检测，经PCR扩增得到预期的296 bp条带；采用靛酚蓝-分光光度法，测得发酵液中铵态氮含量为2.5 mg/L，表明该菌株具有较好的泌铵能力。乙炔还原法测其固氮酶活性，以乙烯生产量表示，结果显示GXGL-4A菌株在无氮培养基上能够有效地还原乙炔，达到232.94 nmol C2H4/(mL·h)。 结论菌株GXGL-4A是一株可较好地分泌铵的新的固氮菌，具有很好的研究价值。
引用本文（GB/T 7714）
李琼洁, LI Qiong-jie, 程杰杰, 等. 玉米联合固氮菌 Kosakonia radicincitans GXGL-4A的分离鉴定与固氮特性研究[J]. 未知来源, 2016.
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