SD-PMA-ddPCR检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌
摘要
目的检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌活菌。 方法利用脱氧胆酸钠(SD)对受损细胞预处理,然后使叠氮溴化丙锭(PMA)进入受损细胞与DNA发生共价交联,提取细菌基因组DNA进行微滴式数字PCR (ddPCR)检测。 结果0.1% SD和5.0 mg/L PMA协同作用,可以有效抑制108 CFU/mL的单核细胞增生李斯特氏菌死菌DNA的PCR扩增。经过SD和PMA对样品预处理,ddPCR可以在死菌存在条件下,定量检测鸡肉中单核细胞增生李斯特氏菌活菌,消除了“假阳性”结果的出现。活菌灵敏度检测结果显示:SD-PMA-ddPCR的灵敏度为 2.0 copies/20 μL。SD-PMA-ddPCR方法精密度和稳定性良好。 结论SD-PMA-ddPCR在检测食源性致病菌方面有巨大的发展空间。
引用本文(GB/T 7714)
Wang Jing, Wang Jing, 刘玉敏, 等. SD-PMA-ddPCR检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌[J]. 未知来源, 2016.
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