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团头鲂 NK-lysin 基因鉴定和表达分析

詹柒凤、Zhan Qifeng、丁祝进、Zhujin Ding、崔蕾、Lei Cui、范君、Jun Fan

2016Immunology and Microbiology被引 1

摘要

为研究抗菌肽NK-LYSIN在团头鲂免疫系统中的可能功能，本实验从团头鲂转录组中钓取到2个 NK-lysin 基因（ nkla 和 nklb ），通过PCR扩增并测序验证其ORF序列。通过荧光定量PCR检测其在健康组织和嗜水气单胞菌感染后免疫组织中的表达，并构建其原核表达体系。结果显示，团头鲂 nkla 和 nklb 分别编码122和136个氨基酸，NKLA和NKLB均属于鞘脂激活蛋白样蛋白家族成员，各含有6个高度保守的半胱氨酸及1个SapB结构域。在健康团头鲂各组织中， nkla 在脾脏中表达量极高，在肌肉和血液中表达量极低；而 nklb 则在肠中表达量较高，在头肾中表达量较低，在其他组织均有表达。 nkla 和 nklb 不同的表达模式暗示它们可能存在功能上的分化。经嗜水气单胞菌感染后，团头鲂 nkla 与 nklb 表达变化模式相似，头肾中，表达量在4 h时显著下降；肝脏中，表达量在4 h达到最高，而后回落到正常水平；在脾脏和肠中4 h时开始下降，72 h时达到峰值，暗示 NK-lysin 可能在团头鲂抗嗜水气单胞菌感染过程中发挥重要作用。另外，本实验对 nkla 和 nklb 进行了原核表达，为进一步研究 NK-lysin 的功能奠定了基础。

引用本文（GB/T 7714）

DOI：https://doi.org/10.11964/jfc.20160110237