基于Keap1-Nrf2/ARE信号传导通路探讨黄芪多糖改善干燥综合征模型大鼠心功能的机制
摘要
目的基于Keap1-Nrf2/ARE信号传导通路探讨黄芪多糖改善干燥综合征（Sjogren′s syndrome，SS）模型大鼠心功能变化的机制。方法将48只Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为4组：空白对照组（空白组）、模型对照组（模型组）、黄芪多糖组（中药组）和羟氯喹组（西药组），每组12只，分别向每只大鼠（空白组除外）两后足跖部注射与弗氏完全佐剂充分乳化后的颌下腺蛋白混合抗原0.1 mL，诱导SS模型。致炎后第19天开始干预，空白组及模型组均给予等量生理盐水（1 mL/100 g），其余组分别给予黄芪多糖（1 mg/100 g）、羟氯喹（0.031 25 g/kg），各组每天干预1次，连续干预30天。给药结束后观察大鼠的体质量变化、饮水量变化、颌下腺指数、脾指数、腺体组织学变化；采用有创血流动力学监测SS模型大鼠心功能的变化；采用ELISA法检测血清中活性氧（reactive oxygen species，ROS）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、总抗氧化能力（total antioxidant capacity，TAC）、TNF-α、IL-35；HE染色观察心肌组织的病理学改变；免疫组化染色观察ROS、活性氮自由基（reactive nitrogen species， RNS）、谷胱甘肽（glutathione，GSH）、硫氧还蛋白（thioredoxin，TRX）表达；实时荧光定量PCR（real time fluorescence quantitative PCR，RTFQ-PCR）检测Keap1、Nrf2、ARE mRNA蛋白的表达；Western blot方法测定大鼠心肌组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-glutamic acid and a half long glycine synthetase，γ-GCS）、血红素氧合酶1（heme oxygenase-1，HO-1）蛋白表达水平。结果与空白组比较，模型组大鼠饮水量、颌下腺指数、脾指数、HR、 心脏指数（HI）、左室收缩期压（LVSP）、左室舒张期压（LVEDP）、MDA、ROS、TNF-α、ROS蛋白表达、RNS蛋白表达、Keap1 mRNA、MafmRNA、Nfr2 mRNA、HO-1蛋白表达、γ-GCS蛋白表达升高