短小芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆、表达及其酶特性研究
摘要
提取短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)基因组,通过PCR克隆了短小芽孢杆菌β-葡聚糖酶基因全长序列.结果表明:该基因全长754 bp,ORF为717 bp,编码239个氨基酸,计算分子量为26.98 kD,等电点为6.08.经Blast分析,该序列与地衣芽孢杆菌同源性最高(91%),该基因首次在GenBank上登录(登录号AY164456).在克隆载体上亚克隆基因全长,构建重组表达载体pET-pum,导入大肠杆菌BL 21中表达.SDS-PAGE电泳表明:在27 kD左右有表达带,酶活较低(7.24 U/mL),仅为出发菌酶活的16%,其最适温度为50 ℃左右,最适pH在5左右.
引用本文(GB/T 7714)
吕文平, 许梓荣, 孙建义, 等. 短小芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆、表达及其酶特性研究[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni, 2004.
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