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东亚砂藓(Rhacomitrum canescens)RNA提取方法的比较和改进

吕凤香沙伟闫苗苗李兵兵

2007生物技术Agricultural and Biological Sciences被引 0

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摘要

方法:以东亚砂藓为材料,用CTAB法、热硼酸盐法和改良的SDS/酸酚法提取东亚砂藓总RNA,并采用3种方法进行沉淀,从提取RNA的纯度、完整性、产量、 耗时和RT-PCR效果等分析确定适用于东亚砂藓总RNA提取的方法.结果:研究表明: CTAB法提取的RNA 28S rRNA明显缺失,泳道模糊不清,杂质多,热硼酸法和改良的SDS/酸酚法提取RNA 28S rRNA,18S rRNA条带清晰,OD260/OD280都在1.7以上,纯度高,但热硼酸法提取出的 RNA有DNA污染,RNA的含量(15.68~35.2 μg.g-1)低于SDS/酸酚法提取RNA的含量 (46.5~51.9 μg.g-1)3种沉淀方法比较认为无水乙醇配合LiCl沉淀RNA节省时间 ,反转录和RT-PCR效果好.结论:改良的SDS/酸酚法适合东亚砂藓RNA的提取.

引用本文(GB/T 7714)

吕凤香, 沙伟, 闫苗苗, 等. 东亚砂藓(Rhacomitrum canescens)RNA提取方法的比较和改进[J]. 生物技术, 2007.

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