GST-hPBD融合蛋白的克隆、表达及活化Rac1蛋白的分析
摘要
目的:制备GST-hPBD融合蛋白,探讨活化的Racl在血管内皮细胞中的表达.方法:采用RT-PCR方法克隆与活化Racl相结合的hPBD基因片段,构建pGEX-2T/hPBD原核表达载体,并纯化GST-hPBD融合蛋白;应用pull down测定血管内皮细胞中活化Racl的蛋白表达.结果:基因测序证实原核表达载体pGEX-2T/hPBD序列正确,并在大肠杆菌中高效表达,纯化得到纯度约75%GST-hPBD融合蛋白,其M,为36000;进一步分析证实血管内皮细胞可表达活化的Racl蛋白.结论:成功构建了人pGEX-2T/hPBD原核表达载体,纯化了GST-hPBD融合蛋白,并检测到血管内皮细胞中活化Racl蛋白的表达.
引用本文(GB/T 7714)
韩雅玲, 孟子敏, Jian Kang, 等. GST-hPBD融合蛋白的克隆、表达及活化Rac1蛋白的分析[J]. 第四军医大学学报, 2004.
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