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乙型肝炎病毒（HBV）反基因与HBV的结合及对HBV复制的影响

高勇、罗端德、蔡淑清、曾令兰、李淑莉

2001中华内科杂志Medicine被引 0

摘要

目的研究三螺旋形成寡核苷酸与HBV基因的结合情况及其对HBV复制的影响.方法合成一段能与HBV核心启动子位点(1734～1753nt)形成三螺旋的寡核苷酸(TFO20)并标记上生物素,分别用脂质体-TFO20及裸TFO20转染HepG2.2.15细胞,用链酶亲和素-生物素法(SABC)检测其转染效率及其与HepG2.2.15细胞中HBVDNA的结合情况;并采用ELISA半定量逆转录(RT)-PCR及荧光定量PCR法分别检测经寡核苷酸处理的.HepG2.2.15细胞及空白对照细胞上清HBsAg、HBeAg、HBVDNA及细胞中HBVRNA的水平.结果脂质体-TFO20转染HepG2.2.15细胞的效率可达80%,而裸TFO20转染率最高为40%;TFO20主要定位于细胞核及胞浆中.TFO20处理组细胞上清中HBsAg、HBeAg含量分别较空白对照组降低37.0%及78.2%,HBVDNA水平较空白对照组明显降低;而细胞中2.4kh/2.1kbRNA、3.5kb/3.4kbRNA亦分别降低31.6%及70.2%.结论TFO20通过脂质体包裹后可以很好地进入细胞并与HBVDNA结合;TFO20能够有效地抑制HBV复制,发挥抗病毒作用.

引用本文（GB/T 7714）