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含RGD模体的人白细胞介素18（IL-18）突变体的酵母表达及其抗血小板聚集活性

卢忠民、赵宝昌

2005中国生物化学与分子生物学报Immunology and Microbiology被引 0

摘要

利用定点突变及DNA重组技术,在人白细胞介素18(IL-18)cDNA序列中插入GGC序列,使IL-18第39位精氨酸残基和第40位天冬氨酸残基之间插入一个甘氨酸残基,从而构建了RGD模体.此重组的cDNA序列构建入表达质粒pPIC9K,并转化Pichia pastoris酵母GS115,利用表达系统进行了高效表达.用Sephdex G-100凝胶过滤纯化表达产物,获得初步纯化的蛋白.对该蛋白进行了血小板聚集抑制实验和对GPⅡb-Ⅲa与Fn结合的抑制实验.含RGD模体的重组IL-18(IL-18RGD)显示了较强的体外抑制血小板聚集活性,IC50=8.8μmol/L;并具有与GPⅡb-Ⅲa的竞争结合活性,IC50=8.0 μmol/L.该含有RGD模体的重组IL-18仍保存对PBMC诱导产生IFN-γ能力.结果表明,此IL-18 RGD嵌合体在具有抗炎,抗感染的同时增添了新的抑制血小板聚集功能.

引用本文（GB/T 7714）