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猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白(OMP)5’末端保守区基因的克隆、表达及其免疫活性研究

刘思国彭永刚王牟平王春来宫强

2004Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunyatseniBiochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 0

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摘要

以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接,构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34 kD,与实际预测相符,命名为GST-OMPc.GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测.结果表明:纯化蛋白GST-OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应.OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础.

引用本文(GB/T 7714)

刘思国, 彭永刚, 王牟平, 等. 猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白(OMP)5’末端保守区基因的克隆、表达及其免疫活性研究[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni, 2004.

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