标本放置时间及年龄对CD4^+CD25^+调节性T细胞的影响
摘要
目的探讨标本放置时间及年龄对外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞的影响,明确标本可放置的时间界限,建立不同年龄段的正常参考值范围。方法以171例不同年龄健康人的外周血为标本,采用双色直接荧光素标记法和多参数流式细胞术检测和分析。结果10份标本均分别在室温下放置0、1、2…3、4、5和6h检测时,CD4^+CD25^+Treg及CD4^+CD25^high T细胞分别为(12.00±1.12)%、(11.56±1.19)%、(10.72±1.29)%、(10.29±1.57)%、(8.11±1.28)%、(7.97±1.07)%、(7.70±0.93)%及(1.41+0.26)%、(1.45±0.26)%、(1.32±0.26)%、(1.27±0.28)%、(1.09±0.24)%、(O.95±0.18)%、(O.91±O.21)%。4~6岁组(n=34)、7~14岁组(n:24)、20~59岁组(n=95)、60岁以上组(n=18)健康人群CD4^+CD25^+Treg参考值分别是(6.55±1.28)%、(9.41±2.08)%、(11.67±2.14)%和(9.73±2.79)%,CD4^+CD25^high分别是(0.92±0.30)%、(1.21±0.45)%、(1.44±0.52)%及(1.51±0.55)%。结论外周血CD4^+CD25^+Treg和CD4^+CD25^high T细胞的检测结果随标本放置时间延长呈逐渐降低趋势,因此为真实反映体内CD4^+CD25^+Treg水平,标本放置时间应限制在3h以内。不同年龄段健康人群外周血中的CD4^+CIY25^+Treg和CD4^+CD25~T数值有明显差异,在探讨各种免疫相关性疾病与CD4^+CD25^+Treg之间的关系时,应该以与其年龄段相匹配的正常参考值为依据。