血管紧张素-II活化肺微血管内皮细胞核因子-κB的研究
摘要
目的探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对肺微血管内皮细胞（HPMEC）核因子-κB（NF-κB）的活性的影响，以及经典途径在AngⅡ介导的NF-κB活化过程中的作用。方法本实验分为：AngⅡ组：10^-6mol／L AngⅡ分别刺激HPMEC0、0．5、1、2、4h；氯沙坦组：10^-6mol／L氯沙坦（AugⅡ1型受体阻滞剂）预先处理HPMEC1h，再予相同10^-6mol／L AugⅡ刺激细胞2h，提取胞浆蛋白和胞核蛋白。凝胶电泳迁移率分析实验（EMSA）观察细胞中NF-κB的DNA结合活性。Western印迹检测细胞浆中抑制因子κBα（IκBα）的含量。结果AugⅡ刺激HPMEC0．5h后细胞中NF-κB活性明显上升（144．5±16．1），在2h达到峰值（270．1±27．2），4h（215．1±17．8）较2h有所下降，但仍高于0h水平，以上各时间点与AngⅡ刺激细胞0h（100．0±25．1）相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。与AngⅡ刺激HPMEC 0h IκBα含量（44．4％±2．1％）相比，0．5h后IκBα含量即开始明显下降（38．9％±3．6％，P〈0．05），2h后IκBα含量下降最为明显（32．6％±2．3％，P〈0．05），4h细胞中IκBα含量较2h有所上升，但仍然明显低于AugⅡ刺激0h细胞中IκBα的含量（40．1％±4．7％，P〈0．05）。氯沙坦组NF-κB活性（115．4±10．7）和IκBα含量（43．6％±3．7％）与AugⅡ组0h相比无明显差异。氯沙坦组中NF-κB活性明显低于AngⅡ组2h，氯沙坦组中IκBα的含量亦明显高于AngⅡ组2h。结论AngⅡ能通过AT1介导HPMEC中NF-κB活化。经典途径参与了AugⅡ诱导的HPMEC中NF-κB活化过程。