人源肝癌单链抗体（scFv）基因真核表达载体的构建和表达
摘要
目的：构建人源肝癌单链抗体（scFv）基因真核表达载体pSectag2／scFv并在中国仓鼠卵巢（CHO）细胞中获得表达。方法：利用噬菌体细胞内重组技术筛选得到了肝癌特异性scFv，用PCR技术及核酸内切酶技术将其克隆入真核表达载体pSectag2，构建重组载体pSectag2／scFv，测序鉴定后，电转染CHO细胞，利用SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白的表达情况。结果：将750bp人源肝癌scFv插入真核表达载体pSectas2，经DNA测序鉴定正确，成功构建了pSectag2／scFv。将pSectag2／scFv转染CHO细胞后获得目的蛋白表达。SDS-PAGE和Western blot检测表明目的蛋白肘，约为34000。结论：成功地构建抗scFv真核表达载体pSectag2／scFv，并在CHO细胞中获得表达，为人源肝癌scFv的进一步的应用研究提供依据。
引用本文（GB/T 7714）
李丙所, 马龙洋, 周红兵, 等. 人源肝癌单链抗体（scFv）基因真核表达载体的构建和表达[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2008.
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