通过T—A克隆技术构建含免疫刺激序列CpG基序的抗SBR DNA疫苗
摘要
目的：构建含免疫刺激序列、能够阻止变形链球菌在牙面粘附的防龋DNA疫苗，方法：根据核表达质粒pS-BR-CTA2B基因序列，设计针对编码变形链菌表面蛋白抗原AgⅠ/Ⅱ分子中唾液蛋白结合区段（SBR）的特异性PCR引物，利用PCR技术由质粒pSBR-CTA2B扩增目的DNA片断；通过T－A克隆技术将目的DNA片段克段于中间载体pMD18-T，鉴定插入方向后，选择插入方向正确的克隆，将目的DNA从中间载体释放，再克隆至含CpG免疫刺激序列的真核表达载体pcDNA3．1。结果：通过对重组质粒pcDNA3.1－SBR进行酶切图谱分析和DNA序列测定分析，证明真核表达重组粒pcDNA3.1－SBR构建成功，开放阅读框架正确。结论：利用T－A克隆等技术可成功将编码SBR的DNA片段到含有免疫刺激用列CpG的真核表达载体pcDNA3.1的适当部位，构建出真核表达重组质粒pcDNA3.1－SBR作为有效防龋的DNA疫苗。
引用本文（GB/T 7714）
姜广水, 杨小青. 通过T—A克隆技术构建含免疫刺激序列CpG基序的抗SBR DNA疫苗[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni, 2002.
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