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甘薯病毒病害(SPVD)的多重RT-PCR检测方法及其应用

Pan Zhang兰新芝乔奇张德胜秦艳红田雨婷王爽张振臣

2013植物保护Agricultural and Biological Sciences被引 0

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摘要

根据甘薯褪绿矮化病毒(Sweetpotatochloroticstuntvirus,SPCSV)热激蛋白(Hsp70)基因和甘薯羽状斑驳病毒(Sweetpotatofeatherymottlevirus,SPFMV)外壳蛋白(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计了4对引物,以单一RT-PCR反应体系为基础,分别对影响多重RT-PCR扩增的退火温度、TaqDNA聚合酶浓度、dNTPs浓度、Mg抖浓度、引物浓度等条件进行了优化,建立了能同时检测SPVD两种病原的多重RTPCR方法。该方法能有效区分SPFMV的主要株系类型。灵敏性试验表明,建立的多重RTPCR方法对SPFMVCH2、SPFMVCH和SPCSV的最低检测浓度分别为1.42×104、1.32×104拷贝/μL和2.47×104拷贝/μL。该方法可用于甘薯叶片和薯块中病毒的检测,为SPVD的监测预警提供了一个有用的工具。

引用本文(GB/T 7714)

Pan Zhang, 兰新芝, 乔奇, 等. 甘薯病毒病害(SPVD)的多重RT-PCR检测方法及其应用[J]. 植物保护, 2013.

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