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pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒的构建及其在体外人脐静脉内皮细胞中抑制Ang2/Tie2基因的表达

Biao Wang、郭国祥、林菊丽、单秀英、张声、鲁开化

2011Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunyatseniBiochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 0

摘要

目的探讨应用RNA干扰（RNAi）技术抑制Ang2、Tie2基因的表达情况,为进一步研究其在体外抑制血管生成以及抑制肿瘤血管生成的动物实验研究奠定基础。方法构建pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒各2条并予以鉴定。用pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒转染人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,采用免疫细胞化学染色和RT-PCR方法检测各组HUVECs中Ang2及Tie2的蛋白及mRNA的表达状况。结果成功构建pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒各2条,用其转染HUVECs后,免疫细胞化学染色和RT-PCR检测结果显示,Ang2、Tie2在蛋白和mRNA的表达水平均受到明显抑制（P〈0.05）,并且siRNA的2条重组质粒之间均差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 pSilencer1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA在体外能够抑制HUVECs的Ang2和Tie2的蛋白及mRNA的表达。

引用本文（GB/T 7714）