人心肌肌钙蛋白I（cTnI）基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化
摘要
目的：研究人cTnⅠ基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化。方法：以pCOMb3—cTnⅠ为模板，用PCR方法得到了编码该蛋白的基因，进一步将该基因克隆到中间载体pUCm—T，再酶切得到cTnⅠ基因插入到pKL载体中，构建成表达质粒pKL—cTnⅠ。在BL21细胞中经IPTG诱导表达，利用载体携带6×His纯化标签，以His Trap Kit纯化重组蛋白，并进行免疫活性测定。结果：融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达，并用His Trap Kit成功纯化目的蛋白。ELISA分析证实该重组蛋白具有与天然心肌肌钙蛋白相似的免疫活性。结论：本研究为建立急性心肌梗死早期诊断试剂奠定了基础。
引用本文（GB/T 7714）
劳兴珍, 吴国球, 沈子龙. 人心肌肌钙蛋白I（cTnI）基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化[J]. 中国新药杂志, 2004.
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