外源性TGF-β3对大鼠肝星状细胞TGF-β3启动子活性和CREB-1的影响
摘要
目的观察转化生长因子β3（TGF—β3）自反馈调节信号通路中正向调节因子的作用。方法用外源性TGF—β3诱导大鼠肝星状细胞系（HSC—T6），在不同时间点用荧光素酶报告基因分析法检测TGF．83的启动子活性，Western印迹法检测cAMP反应元件（CRE）结合蛋白1（CREB-1）和磷酸化CREB-1的表达，实时荧光定量PCR法检测CREB-1mRNA的表达情况。结果外源性TGF—β3处理HSC—T6后，TGF—β3启动子活性表现出时间依赖性增高，并于诱导后24h达峰值[10．68±0．57，2．2倍于对照组（4．83±0．56）]。TGF-β3启动子的基础活性下降了85％（0．73±0．03，P〈0．05）。外源性TGF-β3可在短时问内上调磷酸化CREB-1的表达，与对照组（比值为1）相比，15min即可见明显增加（1．5倍于对照组），1h时其表达量达到最大值（2．0倍于对照组），12h略见下降（1．9倍于对照组，均P〈0．05）。外源性TGF-β3对HSC—T6中CREB-1 mRNA和CREB-1蛋白的表达均无影响（均P〉0．05）。结论外源性TGF—β3可促进TGF—β3启动子活性增强，且CRE位点在外源性TGF—β3介导的TGF—β3启动子活性中发挥重要作用；外源性TGF—β3可活化CREB-1，但不能促进CREB-1蛋白及mRNA的表达。
引用本文（GB/T 7714）
Liang Deng, Li Sia Ying, 黄金明, 等. 外源性TGF-β3对大鼠肝星状细胞TGF-β3启动子活性和CREB-1的影响[J]. 中华医学杂志, 2011.
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