褪黑素逆转人乳腺癌细胞MCF-7／ADM对阿霉素耐药的作用机制
摘要
目的：探讨生理浓度（10^-9mol/L）和药理浓度（≥10^-5mol／L）褪黑素对耐阿霉素乳腺癌细胞系MCF-7／ADM耐药的逆转作用及其机制。方法：应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测经不同浓度的褪黑素孵育后，阿霉素对MCF-7／ADM细胞系半数抑制浓度IC50的改变。在电镜下观察单用阿霉素（20ug／ml）以及药理浓度的褪黑素（10^-5mol/l）孵育后再应用阿霉素（20ug／ml）后MCF-7／ADM细胞超微结构的变化。应用分光光度法测定MCF-7／ADM和MCF-7/s细胞内GSH水平及褪黑素孵育后MCF-7／ADM和MCF-7／s细胞内GSH水平变化。结果：褪黑素孵育前阿霉素作用于MCF-7／ADM的IC50值为24．41ug／ml。经生理浓度（10^-9mol／1）的褪黑素孵育后阿霉素IC50值为20．92ug／ml，两者经比较未见显著性差异（P=0．356）。经浓度为10^-5mol／L和10^-3mol／L的褪黑素孵育后阿霉素作用于MCF-7／ADMIC50值分别成为12．25ug／ml和10．46ug／ml，与孵育前阿霉素作用于MCF-7／ADM的IC50（24．41ug／ml）相比差异均具有显著性（P〈O．01）。在电镜下均可观察到，经药理浓度（10^-5mol／l）的褪黑素孵育后，阿霉素（20ug／ml）对细胞的损伤更为严重。经分光光度法测得MCF-7／ADM细胞内GSH水平明显高于MCF-7／s，生理浓度褪黑素并不能使MCF-7／ADM和MCF-7／s细胞内GSH水平明显降低（P=0．965），而药理浓度的褪黑素可以显著降低MCF-7／ADM和MCF-7／s细胞内GSH水平且具有一定的浓度依赖性（P〈0．01）。结论：生理浓度的褪黑素对MCF-7／ADM的耐药未见明显影响，药理浓度的褪黑素对MCF-7/的ADM耐药性具有较明显逆转作用，其逆转机制可能与褪黑素对细胞内GSH水平调控有关。