小金海棠质膜H^＋-ATPase基因（MxHA2）的克隆及功能分析
摘要
植物质膜H^＋-ATPase能把质子泵出根外酸化土壤,增加铁的溶解度,利于植物对铁的吸收。小金海棠是一个苹果铁高效基因型砧木,为研究质膜H^＋-ATPase在小金海棠铁吸收过程中的功能,本研究通过同源克隆的方法从小金海棠（Malus xiaojinensis）中克隆到了一条全长2865bp含有完整编码区的质膜H^＋-ATPase基因（MxHA2）,编码954个氨基酸（GenBank登录号：JQ867095）。系统进化分析结果表明MxHA2蛋白与碧桃（Prunus persica）的PPA2蛋白亲缘关系较近。基因枪法在洋葱（Allium cepa）表皮内进行亚细胞定位分析,结果表明,MxHA2与GFP的融合蛋白定位于细胞膜上。荧光定量PCR分析表明,缺铁胁迫后,MxHA2基因在根和叶中均有不同程度的增强。把MxHA2基因转化到酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）（BJ2168）后,转MxHA2的酿酒酵母H^＋-ATPase活性极显著增强,且缺铁处理后其生长量持续高于对照,表明该基因编码的蛋白具有H^＋-ATPase活性,其过量表达能提高酵母菌株的耐缺铁性。结果提示,MxHA2可能在小金海棠的耐缺铁胁迫过程中起重要作用,为进一步研究小金海棠的铁高效机理提供了依据,在果树耐缺铁分子育种上有重要的应用前景。
引用本文（GB/T 7714）
槐心体, 王忆, Qian Zhang, 等. 小金海棠质膜H^＋-ATPase基因（MxHA2）的克隆及功能分析[J]. 农业生物技术学报, 2012.
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