基因-病毒治疗系统CNHK500-p53的构建和体外初步研究
摘要
目的构建一种新的基因-病毒治疗系统。方法通过基因操作技术将目的基因表达盒mCMV启动子＋p53基因＋SV40polyA插入腺病毒E1A基因受端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子调控、E1B基因受缺氧反应元件（HRE）启动子调控的增殖病毒载体质粒pSG500的E1A下游，得到腺病毒质粒pSG500-p53；通过pSG500-p53与5型腺病毒右臂的质粒pBHCE3在293细胞中同源重组得到重组病毒CNHK500-p53；利用Western blot和ELISA法检测病毒E1A、E1B基因和p53抑癌基因的表达；TCID50方法测定病毒滴度；通过增殖实验观察重组病毒的选择性增殖能力；应用细胞病理效应（CPE）实验检测病毒抗肿瘤作用。结果CNHK500-p53的病毒滴度为2×10^10pfu／ml，增殖实验证实CNHK500-p53可以选择性地在端粒酶阳性和缺氧微环境的肝癌细胞中增殖，CNHKS00-p53所携带的p53基因在肝癌细胞株中的表达量388±34．6μg／L明显高于非增殖型腺病毒载体Ad-p53的76．3±13．17μg／L（P〈0．005），并显示了较强的抗肿瘤效应。结论CNHK500-p53是一种具备治疗肝癌潜力的新型基因-病毒治疗系统。
引用本文（GB/T 7714）
赵红川, 张 琪, 陈颖华, 等. 基因-病毒治疗系统CNHK500-p53的构建和体外初步研究[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni, 2006.
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