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人碱性成纤维细胞生长因子基因在 COS-7细胞中的表达及活性检测

于凤山、段德义、姜传涛、陈立南、秦丽华、徐群渊

2000解剖学报Biochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 0

摘要

目的 获得人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)，用于治疗 神经系统 疾病；克隆添加Kozak序列的bFGF cDNA序列，用于真核细胞表达。 方法 提取国人脑胶质瘤细 胞系BT325总RNA，RT-PCR法扩增bFGF cDNA片段，重组于pGEM-3zf(+)载体，测序正确后构 建 表达载体，转染猴肾成纤维细胞系COS-7，Western Blot 检测表达，收集培养上清用PC-1 2进行活性检测。 结果 RT-PCR扩增到473bp的带有Kozak序列的cDNA片 段；成功构建了真核表达 载体；在COS-7得到了表达，并有一定的生物活性。 结论 由克隆到的b FGF cDNA片段构建的真核表达载体能在COS-7中表达、分泌，并具有生物活性。

引用本文（GB/T 7714）