负载人恶性黑素瘤相关抗原gp100抗原肽HLA-A^＊2402四聚体制备及鉴定
摘要
目的：构建负载人恶性黑素瘤相关抗原gp100抗原肽的HLA-A^＊2402四聚体并进行鉴定,为分析gp100抗原肽诱发的特异性细胞免疫应答创造条件。方法：以羧基端融合生物素化酶BirA底物肽的HLA-A^＊2402重链胞外域融合蛋白、人β2-微球蛋白、gp100 VYFFLPDHL抗原肽、PE-链亲和素为材料,制备HLA-A^＊2402/VYF四聚体;非还原SDS-PAGE鉴定四聚体四聚化程度;三色免疫荧光标记流式细胞术分析HLA-A^＊2402＋健康志愿者外周血gp100特异性CD8＋T细胞的频率。结果：HLA-A^＊2402/VYF四聚体形成率为83%,所制备的四聚体具有与HLA-A^＊2402＋供者抗原特异性CD8＋T细胞的结合活性,特异性CD8＋T细胞的频率为外周血总CD8＋T细胞的0.02%～0.06%。结论：成功制备HLA-A^＊2402/VYF四聚体并用于检测gp100特异性CD8＋T细胞,为研究HLA-A^＊2402＋黑素瘤患者免疫治疗的机制及疗效监测创造了条件。
引用本文（GB/T 7714）
刘毅, 徐丽慧, 何贤辉, 等. 负载人恶性黑素瘤相关抗原gp100抗原肽HLA-A^＊2402四聚体制备及鉴定[J]. 中华实用诊断与治疗杂志, 2010.
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