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pEGFP-HPV16 E6重组质粒的构建及其在Hela细胞中的表达定位

李丽萍孙曼莉凌国灿

2007南华大学学报:医学版Biochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 0

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摘要

目的构建以绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)为报告基因的重组表达质粒pEGFP-HPV16 E6。方法利用脂质体转染体外培养的Hela细胞,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察pEGFP-HPV16 E6融合蛋白在细胞中的分布和定位,用Western blot方法验证其蛋白的表达。结果在空载体pEGFP-C2转染组中,Hela细胞内绿色荧光呈弥散分布;重组质粒pEGFP-HPV16 E6转染组中,绿色荧光集中在细胞核中。结论pEGFP-HPV16 E6融合基因真核表达载体在真核细胞Hela中获得了表达,细胞所表达的融合蛋白具有HPV16 E6和EGFP的双重活性,可用荧光显微镜直接观察其表达情况及亚细胞定位,为HPV16 E6的功能研究提供了线索。

引用本文(GB/T 7714)

李丽萍, 孙曼莉, 凌国灿. pEGFP-HPV16 E6重组质粒的构建及其在Hela细胞中的表达定位[J]. 南华大学学报:医学版, 2007.

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