人CD226(PTA1)分子胞膜外区的原核表达、复性及免疫反应性的鉴定
摘要
目的构建人CD226(PTA1)分子胞膜外区的原核表达载体,并进行原核表达和复性,为该分子的X线结晶衍射及功能学研究提供充足的蛋白来源.方法将人CD226分子的胞膜外区基因克隆人原核表达载体pBV220,测序证实后,转化宿主菌MC1061/P3并进行温度诱导表达.产物采用稀释加透析法复性,亲和层析柱纯化,并通过Western blot和ELISA对其复性效果进行鉴定.结果温度诱导7 h,目的蛋白的表达量达宿主菌总蛋白量的23.8%,其相对分子质量为30×103,Western blot及ELISA证实其重折叠和复性是成功的.结论成功地获得了人CD226(PTA1)分子胞膜外区的原核表达产物,可用于该分子X线结晶衍射及功能学实验.
引用本文(GB/T 7714)
张新海, 欧阳为明, 贾卫, 等. 人CD226(PTA1)分子胞膜外区的原核表达、复性及免疫反应性的鉴定[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2002.
引文网络
本站仅收录题录与摘要供学习参考,全文版权归属出版方;如有侵权请联系我们删除。