COX-2抑制剂联合survivin反义寡核苷酸抗胰腺癌BxPC-3细胞的效应
摘要
目的：探讨COX-2抑制剂和survivin反义寡核苷酸联合应用对胰腺癌BxPC-3细胞的抗肿瘤效应及其可能机制．方法：应用胰腺癌BxPC-3细胞进行研究，将BxPC-3细胞分为4组：A组（对照组），B组（Celecoxib 80 μmol／L）组，C组（300nmol／L survivin ASODN）．D组（80μmol／L celecoxib＋300nmol／L survivin ASODN）．采用MTT检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡率，caspase-3试剂盒检测qcaspase-3活性，并用RT-PCR才佥测Bc1-2、survivin和Mc1-1的mRNA的变化．结果：将80μmol／L celecoxib和300nmol／Lsurvivin反义寡核苷酸单独或联合作用于胰腺癌BxPC-3细胞24h和48h，D组细胞的存活率明显低于B．C组（24h：41．0％±0．4％VS71．0％±2．2％．63-3％±4．5％：48h：34．2％±1．1％VS61．6％±1．7％，55．0％±3％：P〈0．011．作用24h后，流式细胞仪检测细胞凋亡率显示，D组细胞的凋亡率明显高于B，C组（30．33％±3．49％VS11．93％±1．17％，22．07％±0．93％：P〈0．01）．CaspaSe-3活性在B，C，D组明显高于对照组（0．04867±0．0021，0．02967±0．0021，0．08767±0．0042VS0．007±0．0001：P〈0．01），D组细胞的Caspase-3活性明显高于B，C组（0．08767±0．0042VS0．04867±0．0021．0．02967±0．0021：P〈0．01）．用100i．μmol／L塞来昔布作用于胰腺癌BxPC-3细胞24h后．survivin／13．actin和Mc1-1／β-actin的mRNA的比值明显低于对照组（0．68±0．05VS1．05±0．06，P〈0．01），而Bc1-2／β-actin的mRNA的比值无明显变化（0．99±0．02VS1．07±0．06．P〉0．05）．结论：联合应用COX-2抑制剂塞来昔布和Survivin反义寡核苷酸可明显诱导胰腺癌细胞的凋亡，抑制细胞增殖，并能够明显提高caspase-3活性．COX-2抑制剂塞来昔布诱导细胞凋亡可能通过survivin和Mc1-1途径，而非Bc1-2途径．