蛋白III-α-银环蛇毒素融合蛋白表达质粒的构建及表达
摘要
目的构建适合选择感染性噬菌体（Selectivelyinfectivephage,SIP）技术筛选的蛋白Ⅲ-α-银环蛇毒素（α-Bungarotox-ins,α-BTXs）融合蛋白表达质粒。方法从银环蛇毒腺中提取总RNA,RT-PCR扩增α-BTXs基因,插入表达载体pTTMIN,转化E.coli XL1-Blue,IPTG诱导表达。经SDS-PAGE、Western blot及竞争抑制ELISA法检测融合蛋白的表达。结果获得的α-BTXs基因序列与相关报道完全一致;融合蛋白表达质粒构建正确;融合蛋白的表达量可达菌体总蛋白的20%,可与抗蛇毒素血清发生特异性反应,且保持了α-BTXs的抗原性。结论成功构建了蛋白Ⅲ-α-BTXs融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌中表达了融合蛋白,为利用SIP技术筛选抗α-BTXs人源抗体奠定了基础。
引用本文（GB/T 7714）
高荣凯, 王欲晓, 张海荣, 等. 蛋白III-α-银环蛇毒素融合蛋白表达质粒的构建及表达[J]. 中国生物制品学杂志, 2011.
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