OVA—接头—β2m融合基因的构建及体内特异性CTL的诱导
摘要
构建融合基因OVA-接头-β2m的表达载体，通过接头（linker)序列使β2微球蛋白（β2m）与肽段共价结合。限制其在体内的扩散，以期获得晚具潜力的免疫原结构，采用PCR技术，从人肝癌细胞株SMMC-7721中克隆人β2m基因，拼接上卵白蛋白（OVA）（257-264）序列及接头后，克隆入pET-42b(+)高效表达载体进行诱导表达，对表达产物进行纯化与复性后，用其作为免疫原诱导特异性CTL，并构建H-2K^b四聚体检测特异性CTL。应用H-2K^b四聚体对特异性CTL检测结果与经典的细胞毒试验一致，同时对胞外IFN-γ进行了定量检测，结果表明，OVA-接头-β2m的表达产物可有效诱导体内特异性CTL反应，在体外构建MHC-I类分子四聚体，为特异性T细胞的检测提供了有利的工具。
引用本文（GB/T 7714）
钱丽, 钱关祥. OVA—接头—β2m融合基因的构建及体内特异性CTL的诱导[J]. 生物化学与生物物理学报：英文版, 2002.
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