B→O血型转变工具酶α—半乳糖苷酸cDNA克隆及表达

2000中国生物化学与分子生物学报Engineering被引 0

摘要

α－半乳糖苷酶是实现Ｂ→Ｏ血型转变、制备通用型血的关键工具酶。利用反转录ＰＣＲ方法从中国海南Ｃａｔｉｍｏｒ咖啡豆中克隆α－半乳糖苷酶ｃＤＮＡ，插入嗜甲基酵母Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ分泌表达载体ｐＰＩＣ９Ｋ中，转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓＧＳ１１５，筛选高表达重组菌株，经甲醇诱导表达７ｄ，发酵液总蛋白分泌量约１．２ｍｇ／ｍｌ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ呈现约４１ＫＤ特异表达带，与专一性底物对－硝基－苯基－α－Ｄ－吡

引用本文（GB/T 7714）

杨军, 宫锋. B→O血型转变工具酶α—半乳糖苷酸cDNA克隆及表达[J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2000.

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