人环氧合酶—2（hCOX—2）编码基因的克隆及其反义核酸转染胃癌细胞的初步研究
摘要
环氧合酶－２与肿瘤发生的关系已成为肿瘤研究的新热点之一。本研究旨在获得ｈＣＯＸ－２编码基因序列，构建其正、反义真核表达载体，并用反义重组载体转染ＣＯＸ－２高表达的胃癌细胞，以进一步研究其生物学作用及其在肿瘤发生中的作用机制。方法 按文献报道的ｈＣＯＸ－２核苷酸序列设计合成ＰＣＲ引物，利用总ＲＮＡ抽取试剂盒从ＣＯＸ－２高表达的培养的人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１中提取细胞总ＲＮＡ，反转录合成ｃＤＮＡ，再用ＰＣＲ方法扩增目的基因序列。ＰＣＲ产物经ＤＮＡ序列测定证实后，利用引物５端引入的ＥｃｏＲⅠ，ＸｂａⅠ酶切位点，通过粘端连接，将所获目的基因分别按正、反两个方向定向克隆入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１中，对两种重组质粒分别进行相应的酶切鉴定。采用脂质体介导的方法用ＣＯＸ－２反义核酸转染ＳＧＣ７９０１细胞，经Ｇ４１８筛选后
引用本文（GB/T 7714）
吴汉平, 吴开春. 人环氧合酶—2（hCOX—2）编码基因的克隆及其反义核酸转染胃癌细胞的初步研究[J]. 世界华人消化杂志, 2000.
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